关于Cosmobio purefrex产品介绍
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关于Cosmobio purefrex产品介绍

2021-08-09
浏览次数: 13

PUREfrex®  ——重组无细胞蛋白合成系统

PUREfrex®是一种基于PURE系统技术新开发的体外转录/翻译偶联系统,与S30体外翻译系统不同,PUREfrex®是重组无细胞蛋白合成系统,反应系统由蛋白质、核糖体、氨基酸和NTPs组成。只需将编码感兴趣蛋白质的DNA(mRNA)与试剂盒中溶液IIIIII混合,37℃孵育反应数小时,即可完成蛋白质合成。构成PUREfrex®试剂盒的蛋白质、核糖体和tRNA的制备方法较原PURE体系有所改进,减少了与蛋白质合成无关的污染物质。且PUREfrex®试剂盒中所含的翻译因子和其他蛋白均不包含标签序列,后续可添加任何标签来纯化和检测合成的蛋白质。


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〉参考文献
Shimizu et al. (2001) Nat. Biotechnol., vol. 19, p. 751. PubMed ID: 
11479568
Shimizu et al. (2005) Methods, vol. 36, p. 299. PubMe ID: 
16076456

 

产品特点

● 消除了细胞提取物中的杂蛋白,合成的表达产物分辨率更高;

● 可以同时加入多种模板进行反应,以合成Fab及多聚体;

● 可直接使用PCR产物来作为模板DNA

● 单位体积内合成的蛋白量几乎恒定;

● 操作简便,37℃数小时即可合成;

● 所有的蛋白成分均不包含标签序列,可使用任何标签来纯化和检测合成的蛋白质;

● 可合成活细胞难以合成的强毒性蛋白。

 

PUREfrex®不同版本的选择 

PUREfrex®2.0 - 蛋白质合成量更高,大大降低了RNaseß-半乳糖苷酶的污染,并将每1µL反应混合物的脂多糖(LPS)水平降低至约0.1 EU

PUREfrex®2.1 -  2.1版本试剂盒以2.0版本为基础,未预混还原剂。主要用于合成含有二硫键的靶蛋白。

PUREfrex®1.0 - 蛋白质合成量少于2.02.1版本,但1.0版本反应组分的完整信息已公开。

PUREfrex®1.0 Custom - 厂家可提供基于PUREfrex®1.0试剂盒的定制产品。

 

PUREfrex®2.0试剂盒

PUREfrex®2.0PUREfrex® 1.0的优化版。大大减少了RNaseβ-半乳糖苷酶的污染,此外,每1µL反应混合物的脂多糖(LPS)水平降低至约0.1 EU。与PUREfrex®1.0相比,蛋白质合成量提高了2-10倍。

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1. 合成原核及真核生物蛋白质的结果显示:与PUREfrex®1.0相比,使用PUREfrex®2.0合成时,以上6种蛋白质的合成量都有增加。

 

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2. 与原始PURE系统相比,PUREfrex®2.0大大减少了RNaseβ-半乳糖苷酶的污染,此外,每1µL反应混合物的脂多糖(LPS)水平降低至约0.1 EUPUREfrex®2.0组分的改进纯化大大降低了污染物的水平。

 

PUREfrex®2.0试剂盒组成

试剂

体积

组分说明

Solution I

125 µL

氨基酸, NTPs, tRNAs和酶底物等

Solution II

12.5 µL

蛋白质(30%甘油缓冲液中)

Solution III

25 µL

核糖体(20 µM

DHFR DNA

10 µL

含有大肠杆菌二氢叶酸还原酶(DHFR)基因的PCR产物作为阳性对照。(20 ng /µL)


产品列表

产品名称

规格

总反应体积

试剂盒

PUREfrex®2.0

GFK-PF201-0.25-EX

250 μL

GFK-PF201-0.25-5-EX

250 μL×5

PUREfrex®2.1

GFK-PF213-0.25-EX

250 μL

GFK-PF213-0.25-5-EX

250 μL×5

PUREfrex®1.0

GFK-PF001-0.25-EX

250 μL

GFK-PF001-0.25-EX

250 μL×5

PUREfrex®补充试剂(请根据用途选择蛋白质合成反应液和添加剂)

DnaK Mix

GFK-PF003-0.5-EX

用于500ul的反应混合物

GroE Mix

GFK-PF004-0.5-EX

用于500ul的反应混合物

DsbC Set

GFK-PF005-0.5-EX

用于500ul的反应混合物

PDI Set

GFK-PF006-0.5-EX

用于500ul的反应混合物

EF-P

GFK-PFS052-0.5-EX

用于500ul的反应混合物




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